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Trypsin 0.25% – EDTA in HBSS w/o Calcium w/o Magnesium w/ Phenol Red

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Aplicaciones: La tripsina es una enzima derivada del páncreas porcino que se usa comúnmente para la disociación y desagregación de células y tejidos de mamíferos dependientes de anclaje. La concentración de tripsina necesaria para desalojar a las células no sensibles de su sustrato es del 0,25%. El EDTA, un agente quelante, aumenta la actividad enzimática al eliminar los iones de calcio y magnesio. Estos iones oscurecen los enlaces peptídicos sobre los que actúa la tripsina, además de mejorar la adhesión de célula a célula.

Categoría:
Descripción

N ° CAT: L0931

  • PH teórico: 7.3 ± 0.3
  • Osmolalidad: 300 mOsm / kg±10%
  • Color: naranja – rojo, solución clara.
  • Condiciones de almacenamiento: -20 ° C
  • Período de validez: 24 meses.
  • Pruebas de esterilidad:

– Bacterias en condiciones aerobias y anaerobias.

– hongos y levadura

  • Prueba de crecimiento celular: no hay prueba de crecimiento celular, pero prueba de actividad con células adherentes
  • Composición: Se muestra en el sitio web y en el catálogo; también disponible bajo petición
  • Uso recomendado :

– Respetar las condiciones de almacenamiento del producto.

– No utilizar el producto después de su fecha de caducidad.

– Almacenar el producto en un área protegida de la luz.

– Manipular el producto en condiciones asépticas (por ejemplo: bajo flujo de aire laminar)

– Use ropa adaptada a la manipulación del producto para evitar la contaminación (por ejemplo: guantes, máscara, gorro de higiene, general …)

– Con el fin de preservar todas las calidades del producto, se recomienda descongelar el matraz, alícuotas y luego volver a congelar los matraces producidos en lugar de descongelarlos y volver a congelarlos en cada uso.

– Se recomienda utilizar el producto inmediatamente después de su descongelación.

El producto está destinado a ser utilizado in vitro, solo en laboratorio. No lo utilice en aplicaciones terapéuticas, humanas o veterinarias.

Almacenamiento / Estabilidad: Este producto contiene rojo fenol. El producto se envía en hielo seco y podría haber una importante acumulación de CO2 en el paquete. Este CO2 puede entrar en la solución y bajar el pH ligeramente, dando un color naranja (alrededor de pH 6.5) frente a rosado (alrededor de 7.3). La solución, si es de color naranja (ácida), todavía debe ser buena para nosotros tal como es, o se puede agregar hidróxido de sodio para ajustar el pH.

Usos: El EDTA de tripsina al 0.25% en HBSS sin calcio Sin magnesio con rojo fenol es una solución lista para usar.

  1. Los productos congelados pueden descongelarse en un baño de agua a 37 ° C o durante la noche a entre 2 y 8 ° C.
  2. Aspire el medio gastado del recipiente de cultivo y deséchelo.
  3. Enjuague la monocapa con una pequeña cantidad de solución de tripsina o con una solución de sal libre de calcio y magnesio (como se indica a continuación), aspire y deseche. Catálogo de solución salina tamponada con fosfato de Dulbecco (DPBS) N ° L0615 Catálogo de solución salina equilibrada de Hank (HBSS) N ° L0611
  4. Agregue suficiente solución de tripsina, precalentada en un baño de agua a 37 ° C, para cubrir completamente la monocapa celular.
  5. Incubar el matraz a 37 ° C, o para cultivos más sensibles, a temperatura ambiente o 2 a 8 ° C.
  6. Cuando se complete el proceso de tripsinización, las células aparecerán redondeadas tras el examen microscópico y la solución en el matraz aparecerá turbia. Revise el matraz a menudo para evitar la sobreexposición que puede dañar las células.
  7. La tripsina debe neutralizarse con un medio que contenga suero o con un inhibidor de tripsina. Centrifugar suavemente la suspensión celular y desechar el sobrenadante que contiene tripsina.
  8. Resuspender el sedimento celular con medio fresco y contar o cultivar según se desee.